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中文名稱：利什曼蟲IgG檢測試劑盒

英文名稱：Leishmania IgG test kit

產(chǎn)品規(guī)格：96T

預期用途：

利什曼蟲IgG檢測試劑盒可用于定性篩選血清中的內(nèi)臟利什曼原蟲IgG抗體 。僅用于科研使用。

摘要介紹：

利什曼蟲是一種影響了世界上數(shù)百萬人口的普遍疾病。從范圍來看，利什曼蟲已經(jīng)成為一種遍布各大洲嚴重的感染病，尤其是歐洲，印度，亞洲，非洲和中東地區(qū)。內(nèi)臟利什曼病，又稱為黑熱病，是通過被感染的白蛉叮咬傳播給人類的，這種白蛉寄生于杜氏利什曼蟲復合體。當白蛉與接觸感染對象（比如狗）接觸后就成為利什曼蟲的宿主了。由于內(nèi)臟利什曼蟲攻擊肝脾等內(nèi)臟系統(tǒng)以及免疫系統(tǒng)，通常利什曼蟲已與AIDS感染密切相關(guān)。內(nèi)臟利什曼原蟲是一種高死亡率的嚴重疾病。

幾種測試方法已用于診斷急性內(nèi)臟利什曼病。例如，間接熒光免疫抗體測試（IFAT)和直接凝集實驗（DAT）是實踐中的兩個血清學診斷方法，這是因為抗利什曼蟲抗體的滴度在急性階段通常很高。另一個不太成功的方法是骨髓穿刺。這種方法不僅痛苦和危險，而且成功率也不高。另外，ELISA方法是常用的血清學診斷方法，有時會與IFAT和DAT結(jié)合使用。

檢測原理：

利什曼蟲的IgG檢測試劑盒原理是一個三步溫育過程，即初次溫育涉及利什曼蟲抗原在ELISA板孔上的包被。在這一步中，任何與抗原反應的抗體都會結(jié)合到板孔中。然后，洗凈板孔除去測試樣品。隨后加入酶標記物。在第二次溫育時，酶標記物將與任何存在的抗體結(jié)合。在第三次溫育前，需要充分洗滌板孔。然后加入顯色劑四甲基聯(lián)苯胺（TMB)。酶標記物催化過氧化氫的氧化反應，顯色劑變?yōu)樗{色。加入終止液后藍色會變?yōu)槊髁恋狞S色。反應即終止?？捎妹笜朔治鰞x讀取實驗結(jié)果。

組成成分：

試驗需要但未提供的設備：

1. 移液管

2. 洗滌板條用的擠壓瓶

3. 去離子水

4. 帶有450nm和620-650nm波長濾光片的酶標分析儀（可選目測讀取結(jié)果）

5. 血清稀釋用試管

實驗步驟：

1. 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上2個質(zhì)控品決定所需的板條數(shù)，并將其放置在托架上。

2. 加入100µl的陰性質(zhì)控至1號孔，100µl的陽性質(zhì)控至2號孔，以及將100µl稀釋過的樣品（1：40）溶液加入到剩下的孔中。（已稀釋）

3. 在室溫（15-25℃）下溫育10分鐘。

4. 震蕩甩出洗滌液，并用稀釋過的洗滌緩沖液清洗三次。

5. 每孔加入2滴酶標物。

6. 室溫下溫育10分鐘。

7. 震蕩甩出洗滌液，并用洗滌緩沖液清洗三次。

8. 每孔加入2滴顯色劑。

9. 在室溫下溫育5分鐘。

10. 加入2滴終止液，輕敲ELISA板使孔內(nèi)溶液混合。

11. 對空氣讀數(shù)調(diào)零后讀取450nm處的OD值（參考波長620-650nm）